pcr 条件我做了IGF-1基因5'调制区的,按照别人发的文章条件跑的PCR,自己又优化了条件,结果PCR产物经检测,有目的条带,但好像在100bp下面有一条条带,我怀疑是引物二聚体.请问各位有什么办法能
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/05 18:42:39
![pcr 条件我做了IGF-1基因5'调制区的,按照别人发的文章条件跑的PCR,自己又优化了条件,结果PCR产物经检测,有目的条带,但好像在100bp下面有一条条带,我怀疑是引物二聚体.请问各位有什么办法能](/uploads/image/z/11213694-54-4.jpg?t=pcr+%E6%9D%A1%E4%BB%B6%E6%88%91%E5%81%9A%E4%BA%86IGF-1%E5%9F%BA%E5%9B%A05%27%E8%B0%83%E5%88%B6%E5%8C%BA%E7%9A%84%2C%E6%8C%89%E7%85%A7%E5%88%AB%E4%BA%BA%E5%8F%91%E7%9A%84%E6%96%87%E7%AB%A0%E6%9D%A1%E4%BB%B6%E8%B7%91%E7%9A%84PCR%2C%E8%87%AA%E5%B7%B1%E5%8F%88%E4%BC%98%E5%8C%96%E4%BA%86%E6%9D%A1%E4%BB%B6%2C%E7%BB%93%E6%9E%9CPCR%E4%BA%A7%E7%89%A9%E7%BB%8F%E6%A3%80%E6%B5%8B%2C%E6%9C%89%E7%9B%AE%E7%9A%84%E6%9D%A1%E5%B8%A6%2C%E4%BD%86%E5%A5%BD%E5%83%8F%E5%9C%A8100bp%E4%B8%8B%E9%9D%A2%E6%9C%89%E4%B8%80%E6%9D%A1%E6%9D%A1%E5%B8%A6%2C%E6%88%91%E6%80%80%E7%96%91%E6%98%AF%E5%BC%95%E7%89%A9%E4%BA%8C%E8%81%9A%E4%BD%93.%E8%AF%B7%E9%97%AE%E5%90%84%E4%BD%8D%E6%9C%89%E4%BB%80%E4%B9%88%E5%8A%9E%E6%B3%95%E8%83%BD)
pcr 条件我做了IGF-1基因5'调制区的,按照别人发的文章条件跑的PCR,自己又优化了条件,结果PCR产物经检测,有目的条带,但好像在100bp下面有一条条带,我怀疑是引物二聚体.请问各位有什么办法能
pcr 条件
我做了IGF-1基因5'调制区的,按照别人发的文章条件跑的PCR,自己又优化了条件,结果PCR产物经检测,有目的条带,但好像在100bp下面有一条条带,我怀疑是引物二聚体.请问各位有什么办法能将这条带去掉呀?退火温度我做了梯度试验,55-61度.
目的条带很清楚,最下面有引物二聚体条带,这样的PCR的产物能做酶切吗?
pcr 条件我做了IGF-1基因5'调制区的,按照别人发的文章条件跑的PCR,自己又优化了条件,结果PCR产物经检测,有目的条带,但好像在100bp下面有一条条带,我怀疑是引物二聚体.请问各位有什么办法能
引物二聚体出现没关系的,直接回收目的条带即可.对实验没有什么影响.
太专业了!!!!!!!!!!!!!!!!
引物二聚体不会影响酶切,因为你做酶切之前,PCR产物要经过电泳,切胶,纯化,这些步骤早就已经去除了包括引物二聚体在内的杂质。
如果你想要电泳图漂亮,非得没有引物二聚体,那也可以,减少引物在PCR反应体系中的量,减半差不多了。如果你做61度的时候还能做出目的条带,那可以考虑63度退火,这样也可以减少引物二聚体...
全部展开
引物二聚体不会影响酶切,因为你做酶切之前,PCR产物要经过电泳,切胶,纯化,这些步骤早就已经去除了包括引物二聚体在内的杂质。
如果你想要电泳图漂亮,非得没有引物二聚体,那也可以,减少引物在PCR反应体系中的量,减半差不多了。如果你做61度的时候还能做出目的条带,那可以考虑63度退火,这样也可以减少引物二聚体
收起