真核细胞基因的转染方法步骤是什么?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/06 09:42:49
真核细胞基因的转染方法步骤是什么?
真核细胞基因的转染方法步骤是什么?
真核细胞基因的转染方法步骤是什么?
1.配置TBS-D溶液 100mlTBS加入20%葡萄糖溶液0.5ml,至终浓度为1%. 2.配置DEAE-dextran-DNA-TBS-D转染液 DEAE-dextran 1mg/ml DNA(超螺旋) 5-10ug/ml(DNA浓度根据细胞种类、细胞密度及质粒种类决定,最适浓度经预实验确定) 转染液数量根据细胞多少决定,一般每瓶细胞需300ul. 3.以5×105/瓶密度接种细胞,培养24小时. 4.细胞弃培养基, PBS 5ml洗两遍, TBS-D洗一遍,吸尽残液. 5.加入转染液,摇动培养瓶,使其与细胞充分接触,放入孵箱温育20-40分钟,观察细胞至皱缩变圆为止. 6.吸去转染液,TBS-D洗两遍, PBS洗一遍(动作必须轻柔,避免已转染DNA的细胞脱落),加入10ml全培养基 3%CO2浓度37℃培养. 真核细胞基因的转染方法,生物帮上面有的,探针检测试剂盒 http://product.bio1000.com/100045/
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